期刊简介
本刊为全国一类中医学术性期刊，以报道本院教育、科研成果和临床经验为主，兼顾本省及国内外有学术见解的优秀中医学论文，以提高为主兼顾指导自学。
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首页>浙江中医药大学学报杂志
- 杂志名称：浙江中医药大学学报杂志
- 主管单位：浙江中医药大学
- 主办单位：浙江中医药大学
- 国际刊号：1005-5509
- 国内刊号：33-1349/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1989年获浙江省高校学报编辑质量三等奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中)
浙贝母土壤真菌DNA提取方法的优化
袁小凤；路京；宋皓军；刘文洪
关键词：浙贝母, 根际土壤, DNA提取, 巢式PCR, 变性凝胶梯度电泳
摘要：[目的]由于土壤理化性质的复杂性和真菌细胞壁结构的特殊性,从土壤样品中提取真菌基因组DNA往往比较困难,本实验通过方法优化以寻找适合浙贝母土壤真菌DNA的佳方法.[方法]分别采用传统玻璃珠法,Ultra CleanTM土壤DNA提取试剂盒法及改进的试剂盒法等3种方法,提取宁波浙贝母种植区的根际土壤微生物总DNA,利用巢式PCR扩增真菌DNA片段.[结果]3种方法均可提取土壤微生物总DNA.其中改进的试剂盒法提取的DNA电泳结果条带清晰,试剂盒法提取的DNA电泳结果次之,传统玻璃珠法提取的DNA电泳条带不清晰,且有拖尾.对上述三种方法所提取的DNA做巢式PCR分析真菌特异性,传统方法电泳无目的条带,试剂盒法只有第一次PCR电泳有目的条带,只有改进的UltracleanTM土壤DNA提取试剂盒法终获得了350 bp左右的目的条带,而且利用变性凝胶梯度电泳技术(Denatured gradient gel electrophoresis,DGGE)成功地检测到不同种源以及根际与非根际土中微生物的差异.因此认为改进的试剂盒法为提取土壤真菌DNA的优选择.[结论]在土壤真菌DNA提取中,合适的振荡方法是土壤真菌能否破壁的关键性因素.
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