期刊简介
本刊为全国一类中医学术性期刊，以报道本院教育、科研成果和临床经验为主，兼顾本省及国内外有学术见解的优秀中医学论文，以提高为主兼顾指导自学。
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首页>浙江中医药大学学报杂志
- 杂志名称：浙江中医药大学学报杂志
- 主管单位：浙江中医药大学
- 主办单位：浙江中医药大学
- 国际刊号：1005-5509
- 国内刊号：33-1349/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1989年获浙江省高校学报编辑质量三等奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中)
HIF-1α基因慢病毒载体的构建和鉴定
王标；余勤；周丽萍；付珊；朱振洪；单威；刘伟；胡韶君
关键词：HIF-1α, 慢病毒载体, 293T细胞
摘要：[目的]构建带有大鼠HIF-1α基因的慢病毒表达载体,并进行病毒颗粒的包装与对293T的转染.[方法]从pEGFP-N1-HIF-1α载体中扩增出HIF-1α基因片段,将目的基因与pLenti6.3-MCS-RES2-EGFP载体连接,获得慢病毒表达载体pLenti6.3-HIF-1 α-IRES2-EGFP,并用磷酸钙转染法将其与慢病毒包装系统共同转染到293T细胞内进行病毒包装,48h后收集上清液并过滤,按不同感染复数感染293T细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达来测定病毒滴度和感染效率.[结果]构建了共表达HIF-1α基因和EGFP基因的重组慢病毒载体pLenti6.3-HIF-1 α-IRES2-EGFP,经PCR及测序结果证实,并对其成功包装出慢病毒,病毒滴度为4×106TU/ml.[结论]成功构建出HIF-1α基因重组慢病毒载体pLenti6.3-HIF-1 α-IRES2-EGFP并能有效的包装出慢病毒.
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