期刊简介
本刊为全国一类中医学术性期刊，以报道本院教育、科研成果和临床经验为主，兼顾本省及国内外有学术见解的优秀中医学论文，以提高为主兼顾指导自学。
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首页>浙江中医药大学学报杂志
- 杂志名称：浙江中医药大学学报杂志
- 主管单位：浙江中医药大学
- 主办单位：浙江中医药大学
- 国际刊号：1005-5509
- 国内刊号：33-1349/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1989年获浙江省高校学报编辑质量三等奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中)
GRα-GST融合表达载体的构建及重组蛋白的表达
涂继方；温成平；孙静；徐莉；谢志军
关键词：糖皮质激素受体α, 融合蛋白, 原核表达, pGEX-4T-1载体
摘要：[目的]构建GRα-GST融合表达载体并获得重组蛋白,以期为筛选类糖皮质激素样中药提供工具.[方法]运用RT-PCR扩增得到包含CDS的GRα基因序列后,经T-A克隆插入PMD-18载体.以此重组载体为模板扩增含有BamH I与Xho I酶切位点的GRαORF,插入pGEX-4T-1载体后形成了重组载体,并使其在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达融合蛋白,再用SDS-PAGE检测融合蛋白的表达.[结果]成功的将GRα-全基因构建入原核表达载体pGEX-4T-1中.测序结果表明载体构建成功,无插入和移码突变.经IPTG诱导后获得与预测大小(112kDa)完全一致的目的蛋白即GRα-GST融合蛋白.[结论]成功获得了含重组载体的大肠杆菌,并在IPTG诱导下较好的表达,得到了GRα-GST融合蛋白.
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