期刊简介
本刊为全国一类中医学术性期刊,以报道本院教育、科研成果和临床经验为主,兼顾本省及国内外有学术见解的优秀中医学论文,以提高为主兼顾指导自学。
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首页>浙江中医药大学学报杂志

- 杂志名称:浙江中医药大学学报杂志
- 主管单位:浙江中医药大学
- 主办单位:浙江中医药大学
- 国际刊号:1005-5509
- 国内刊号:33-1349/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:1989年获浙江省高校学报编辑质量三等奖期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中)
大鼠ATPase a3基因siRNA筛选及慢病毒载体构建
杜文喜;童培建;吴承亮;方剑利;姜月艳;刘慧
关键词:大鼠, ATPase a3基因, RNA干扰, 慢病毒
摘要:[目的]设计、筛选大鼠破骨细胞(osteoclast,OC)骨吸收关键基因ATPase a3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)并构建其慢病毒表达载体,为研究以OC亢进的骨代谢疾病莫定基础.[方法]设计ATPase a3基因shRNA序列并合成小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)结构的DNA,退火形成双链DNA,与经Hpa I和Xho I酶切慢病毒pGCL-GFP载体连接,构建成携带ATPase a3-shRNA慢病毒质粒载体(pGCL-ATPase a3-shRNA),PCR及测序鉴定后,Western blot筛选出携带佳siRNA的慢病毒质粒载体,并利用慢病毒包装质粒(pHelper 1.0和pHelper 2.0)将其制备成ATPase a3-shRNA慢病毒,并测定病毒滴度.[结果]成功构建出ATPase a3-shRNA慢病毒载体,Western blot筛选出携带佳siRNA片段,并将其成功包装成5×108Tu.mL-1滴度的ATPase a3-shRNA慢病毒.[结论]成功构建大鼠ATPase a3基因RNAi慢病毒.
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